N-arakidonyletanolaminin (AEA) kertymä pikkuaivosoluun

J Neurochem. 1997 Aug;69(2):631-8. Accumulation of N-arachidonoylethanolamine (anandamide)(AEA)  into cerebellar granule cells occurs via facilitated diffusion.

Hillard CJ, Edgemond WS, Jarrahian A, Campbell WB. Source Department of Pharmacology and Toxicology, Medical College of Wisconsin, Milwaukee 53226, USA.

Tiivistelmä  Abstract
 N-arakidonyletanolamini(AEA)  on mahdollinen  ligandi  CB-reseptorille

• N-Arachidonoylethanolamine (anandamide, AEA) is a putative endogenous ligand of the cannabinoid receptor .Intakti pikkuaivojen granulaarinen neuroni primäärisessä viljelmässä akkumuloi nopeasti arakidonyletylamidia eli anandamidia (AEA) - tätä akkumuloitumista ei estä oubaiini tai ec-natriumin poisto

Intact cerebellar granule neurons in primary culture rapidly accumulate AEA. [3H]AEA accumulation by cerebellar granule cells is dependent on incubation time (t(1/2) of 2.6 +/- 0.8 min at 37 degrees C) and temperature. The accumulation of AEA is saturable and has an apparent Km of 41 +/- 15 microM and a Vmax of 0.61 +/- 0.04 nmol/min/10(6) cells. [3H]AEA accumulation by cerebellar granule cells is significantly reduced by 200 microM phloretin (57.4 +/- 4% of control) in a noncompetitive manner.  [3H]AEA accumulation is not inhibited by either ouabain or removal of extracellular sodium.

•  Tritiumilla merkatun Arakidonyletanolaminin akkumulaatio oli  kohtalaisen  selektiivistä  AEA:n suhteen  kaikkien luonnostaan esiintyvien N-asyylietanolaminien joukossa. , paitsi että N-oleyletanolamini merkitsevästi esti radioaktiivisesti merkatun  ( 3H)-AEA akkumuloitumista.10umol  pitoisuudessa.

[3H]AEA accumulation is fairly selective for AEA among other naturally occurring N-acylethanolamines;
only N-oleoylethanolamine significantly inhibited [3H]AEA accumulation at a concentration of 10 microM. 

• Palmitiinihapon (C16: 0)  etanolamidi ja linoleenihapon (C18:3)  etanolamidi olivat inaktiivisia 10 uMol pitoisuudessa. AEA:n kanssa  kilpaili akkumulaatiossa N-Arakidonyylibenzylamini ja N-arakidonyylipropylamini.  Mutta arakidonihappo(C20:4), 15-OH-AEA tai 12-OH-AEA eivät  kilpailleet  AEA:n  kanssa akkumulaatiossa.

The ethanolamides of palmitic acid and linolenic acid were inactive at 10 microM.
N-Arachidonoylbenzylamine and N-arachidonoylpropylamine, 
 but not arachidonic acid, 15-hydroxy-AEA, or 12-hydroxy-AEA, compete for AEA accumulation.

•  Kun  solut ovat edeltä käsitelty  (3H)AEA:lla tapahtuu lämpötilasta riippuva effluxia puoliintumisajan olleesa 1.9 minuuttia. Floretiini ei estä tätä merkatun  anandamidin  effluxia soluista. 

When cells are preloaded with [3H]AEA, temperature-dependent efflux occurs with a half-life of 1.9 +/- 1.0 min. Phloretin does not inhibit [3H]AEA efflux from cells.

•  Tuloksista  voidaan päätellä että anandamidi akkumuloituu pikkuaivojen granulaarisiin soluihin  proiteiiniväliteisellä kuljetusprosessilla, jota luonnehtii  kiihdytettävissä oleva  diffuusio.

 These results suggest that AEA is accumulated by cerebellar granule cells by a protein-mediated transport process that has the characteristics of facilitated diffusion.

Suom.  15.5. 2014